什么是质粒，质粒（plasmid）存在于许多细菌以及酵母菌等生物中，是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子。百度百科，对于和DNA、蛋白、微生物打交道的同学来说，质粒是相当常见的东西，如定义所说，质粒是一种小型环状DNA分子。质粒常用于搭载外源基因，导入受体菌种，进行蛋白表达。老簏见过或者听说过的质粒没有100 也有80，而实际用过的只有10来种。在目前Addgene质粒数据库中，已经收藏了大约45000种质粒，有的质粒是天然的，有的是人为设计的；有的适用于微生物，有的则是用于更高级细胞；有“无限”复制的pUC系列，也有兄弟众多的pET系列。总之质粒种类繁多，变化多样，在接下来的内容中，我们就来聊聊，一般的用于微生物表达的质粒有哪些特点。任质粒如何变化，老簏认为，有四个方面信息是我们在选择质粒之前应该考虑的：复制源（origin of replication）、复制能力（copy number）、抗性选择（antibiotic resistance）和与其他质粒的兼容（incompatibility）。复制源--origin，pBR322，这是最早适用于大肠杆菌E.coli分子克隆的质粒，至今仍然有很多人在用pBR322及其衍生版本。pBR322（GeneBank accession: J01749.1）是由两名墨西哥科学家Boliver (B) 和Rodriguez (R) 于1977年设计的，长度在4.5kb左右，包含一个复制源序列（rep）、一个rop蛋白序列、一个Ampicilin抗性片段（AmpR）和一个tetracycline抗性片段（TetcR）。rep复制起点序列是质粒上十分重要的一个组成部分，它诱导宿主细胞启动DNA复制机制，使得质粒本身得以复制。pBR322的复制起点序列被称为pMB1，而这里的pMB1并不是一个能诱导极高复制能力的起点，但也可以保证每个宿主细胞包含15-20个质粒。